血球試劑小編為您介紹下血細胞分析儀檢測方法之多角度偏振光激光散射技術。
美國雅培公司(ABBOTT)推出的血細胞分析儀,在白細胞分類中采用獨特的多角度偏振光散射(MAPSS)技術,其所生產(chǎn)的血細胞計數(shù)儀從CELL-DYN 3000,3200,3500,3700,4000,以及Sapphire(藍寶石),在白細胞分類上均采用了MAPSS技術。該技術基本原理是細胞在激光束的照射下,在多個角度都產(chǎn)生散射光,儀器在四個角度的四個檢測器將接收到的相應的散射光信號,然后經(jīng)過微處理器分析處理,將各類細胞安置在散點圖上的相應位置,并計算出白細胞分類結果。
多角度偏振光散射白細胞分類技術(Multi—Angle Polatised Scatter Separation of white cell,MAPSS)其原理是一定體積的全血標本用鞘流液按適當比例稀釋。其白細胞內(nèi)部結構近似于自然狀態(tài),因嗜堿性粒細胞顆粒具有吸濕的特性,所以嗜堿性粒細胞的結構有輕微改變。紅細胞內(nèi)部的滲透壓高于鞘液滲透壓而發(fā)生改變,紅細胞內(nèi)的血紅蛋白從細胞內(nèi)游離出來,而鞘液內(nèi)的水分進入紅細胞中,細胞膜的結構仍然完整,但此時的紅細胞折光指數(shù)與鞘液的相同,故紅細胞不干擾白細胞檢測。在鞘流系統(tǒng)的作用下,樣本被集中為一個直徑30μm的小股液流,該液流將稀釋的血細胞單個排列,然后通過激光束,激光照射于細胞上,在各個方向都有其散射光出現(xiàn)。
1) 0°為前向角散射光,可粗略地測定細胞大?。?/p>
2) 10°為狹角散射光,可測細胞結構及其復雜性的相對特征;
3) 90°垂直光散射,主要對細胞內(nèi)部顆粒和細胞成分進行測量。
4) 90°為消偏振光散射,基于顆??梢詫⒋怪苯嵌鹊钠窦す庀竦奶匦裕瑢⑹人峒毎麖闹行粤<毎推渌毎蟹蛛x出來。
5) 這四個角度同時對單個白細胞進行測量和分析后,即可將白細胞劃分為嗜酸性粒細胞、中性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞5種。ABBOTT的五分類法定量很有意思,不用傳統(tǒng)的體積定量,而是采用數(shù)量定量,每次計數(shù)時完成10000個細胞測定即停止。
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